Probans exsecutionem primariorum ac percontatur in praematuro PCR reagentium et determinans condiciones reactionis aptissimas sunt necessariae condiciones ut lenis experimentorum formalium progressus invigilet.
Quomodo igitur opus est ut primum perscrutatio confirmetur in praematuro?
Indicatores principales sunt baseline, amplificatio curva, et valor, amplificatio efficientia, humilis-concentratio specimen detectionis, CV, etc.
Baseline
Linea baseline est linea horizontalis in ampliatione pcr curvam.In primis paucis cyclis PCR reactionis amplificationis, signum fluorescens multum non mutat et lineam rectam format.Haec linea recta baseline est.
Cum primum perscrutatur protegendo, attende num baseline plana sit.Puritas primae speciminis concentrationis baseline afficiet, ut baseline causat ut oriatur vel cadat.Intuitive baseline etiam valde indicatum est.
amplificatio curva
Aliud signum intuitivum est figura amplificationis curvae.Praestat habere curvam S informatam ad vitandas amplificationes secundas vel alias curvas amplificandas abnormes.
Ct Value
Numerus cyclorum ad punctum incurvationis a baseline usque ad incrementum exponentiae respondentium est Ct valor.
Ad idem specimen, diversus primus primus rimatur in diversis curvarum amplificationibus, et valoris respondentis Ct valor amplificationis efficientiae et impedimenti gradus afficientur.In theoria, quo minus, Ct valor primi speciminis eligimus, melior est.
amplificatio Efficens
Una ex certissimis et stabilibus modis ad efficientiam amplificationis pcr aestimandam est curva mensura, quae etiam ab investigatoribus late cognoscitur.Modus involvit seriem exemplorum ad relatum numerum exemplorum scopum refrenandum.Haec exempla solent fieri solutionum stirpis contractae per solutiones solutionum serialium, frequentissimus dilutio 10-triplex est.Utens serie exemplorum dilutorum, utens programmatis qPCR vexillum ad valorem Cq ampliandum, ac denique ducatur curva norma secundum cuiusque specimen et valorem respondentem Cq ad obtinendam aequationem linearem Cq= -klgX0+b, et amplificationem efficientiam E=10(-1/k)-1.Cum qPCR pro analysi quantitatis utendo, amplificatio efficientiae requiritur ut sit in visibilibus 90%-110% (3.6>k>3.1).
Low-concentratio Exempla Deprehensio
Cum intentio specimen est humilis, deprehensio variarum primariorum speculationum variae sunt diversae.Delectamus 20 exempla humili intentione ad replicandum, et ratio primario-probalis cum summa deprehensione optima est.
Coefficiens Variationis (CV)
Exempla 10 duplicata deprehendi possunt cum diversis primis rimis secundum rectam modum detectionis acidi nucleici amplificationis deprehensio.
Reagentia quantitatis:
Sagaciter
Accuratio intra unam massam occurrere debet: coëfficiens variationis (CV, %) logarithmicae valoris tentationis ≤5% est.Cum intentio sample est humilis, coëfficiens variationis (CV, %) logarithmi detectionis conducit, ≤10% est
Qualative reagentia:
Sagaciter
Accuratio intra unam batch occurrere debet:
(1) Coefficiens variationis valoris Ct (CV,%) ≤5%
Idem specimen probatur in parallelis pro X temporibus, et eventus probatus constare debet
Post tempus: Sep-18-2021
