• facebook
  • linkedin
  • youtube

Credo omnes difficultates semper occurrere cum pcr motus agendi, sed pleraeque in duabus quaestionibus principalibus collocari possunt:

Parum amplificationis gene template (amplification);
Nimis non-gene amplificationis scopum.
Usura additativa una est strategies communis ad has difficultates solvendas.Plerumque munus additivorum duas habet aspectus;
secundarium structuramgenesis (secondary structure);
Utilia priming reducere non.
Hodie, editor breviter tibi tradet additiones communes in pcr motus et functiones.
Additiones quae structuram secundariam minuunt
sulfoxide(DMSO)
gene exemplamagna GC content.Nihilominus, DMSO etiam magnopere reducens Taq polymerase actionem.Omnes igitur promptitudines ac activitates polymerasi paria sunt.Editor suggerit te conari posse diversas concentrationes DSMO, quales sunt ab 2% ad 10%, invenire intentionem quae experimento tuo convenit.
Non-ionic detergents
Non-ionica detergent, ut 0.1-1% Triton X-100, Inter 20 vel NP-40, plerumque DNA structuram secundariam minuere solet.Quamvis haec amplificatio gene templates augere possit, etiam molestiam amplificationis specialium non-faciet.Ita, haec additamenta bene operantur ad motus low-cessus PCR sine obstantia, sed non ita bene pro relationibus impuris PRC reactionibus.Aliud beneficium detergentiarum non-ionicorum est reductione SDS contaminationis.Plerumque in processu extractionis DNA, SDS adducetur ad gradum PCR, qui activitates polymerasis valde vetat.Ideo addito 0.5% inter XX vel Twendecim-40 reactionem potest corrumpere effectus negativos SDS.
Betaine_
Betaine DNA amplificationem emendare potest reducendo structuram secundariam formationis et generaliter "mysterium" additionem ad commerciales PCR kits.Si betaine uti voles, debes ponere vel betaine vel betaine mono-hydrate (Betaine vel Betaine mono-hydrate), sed non tene hydrochloridem (Betaine HCl), accommodare ad ultimam intentionem 1-1.7M.Betaine etiam specificationem meliorem adiuvare potest quia basis compositionis dependentiam DNA liquefactionem/DNA denaturationem eliminat.
Additiones ad redigendum priming non specialium
Formamide
Formamide organica PCR ELOGIUM communiter adhibitum est.Cum sulcus maiori et minore sulcus in DNA coniungi potest, eo quod stabilitatem domini DNA helix duplicem minuit et liquationem temperaturae DNA deprimit.Concentratio formamideae in PCR experimentis adhibita plerumque 1%-5% est.
TetramethylAmmonium chloride( TMAC)
Tetramethylammonium chloridum specificitatem hybridizationis (specificationis hybridizationis) augere potest et liquationem temperaturae DNA augere.Sic TMAC removere potest priming specifica non et disiungens DNA et RNA reducere.Si uterisdegeneres primersin PC reactionem memento TMAC addere, quod communiter adhibetur ad concentratio 15-100mM.
Aliae Additiones Communia
Praeter duo genera additivorum supra memoratorum, multae sunt communes additiones in PC motus, quamvis diversas functiones habent, etiam gravissima sunt.
Magnesium ion
Ion Magnesium cofactor (cofactor) polymerasium necessarium est, hoc est, sine Ione magnesii, polymerase iners est.Sed nimis magnesii iones efficaciam polymerasi possunt etiam afficere.Concentratio magnesii ionum in unaquaque PER reactione variabitur.Procuratores chelantes (qualis EDTA vel citratus), coniunctio dNTPs et servo, omnes retrahitur ions magnesii.Itaque, si problemata cum PCR experimento tuo habes, conari potes varias concentrationes magnesii immutare, exempli gratia, ab 1.0 ad 4.0mM, interposito 0.5-1mM intercedente.
Notatu dignum est cyclos multos congelosatos cyclos conducere posse ad stratificationem concentrationis solutionis magnesii chloridi.Ergo ante unumquemque usum illud penitus dissolve et ante utendo bene permisceto.
Serum bovinum albumin(Bovine albumin, BSA)
In experimentis chemiae hypotheticis, serum bovinum albumin est valde commune additivum, praesertim in restrictione enzyme digestionis et pcr experimentorum.In PCR reactiones, BSA adiuvat in reducendo contaminantium compositiones phenolicas.Et etiam dicitur quod adhaesionem reactantium ad murum testudinis tubuli reducere potest.In PCR reactionem, coniunctio BSA addita solet attingere 0.8 mg/ml.
 
Related Products:
PCR Hero(cum tinctura)
PCR Hero


Post tempus: Feb-10-2023