Tempus reale PCR, quod quantitatis PCR vel qPCR notum est, methodus est pro temporis reali vigilantia et analysi PCR productorum amplificationis.
Quia quantitatis PCR commoda operationis simplicis, celeritatis et opportunae, summae sensus, bonae iterabilitatis, et humilis contagione rate, late in medicinae experimento, medicamento efficacia aestimatione, gene expressione inquisitionis, inquisitionis transgenicae, deprehensio gene, deprehensio pathogeni, deprehensio animalis et plantae est.et alimenta probatio et alia prata.
Sive ergo in rebus praecipuis inquisitionis in vita scientiarum, sive operariorum pharmaceuticae societatum, pecuariarum societatum, cibaria societates, vel etiam ministrorum introitus exitus inspectionis et quarentenam bureaus, vigilantia Dicasteria, nosocomia et alia unitates, plus minusve exposita eris aut scire debes cognitionem quantitatis PCR dominandi.

Principium Verus tempus PCR

Tempus reale PCR methodus est qua fluorescentium substantiae ad systema reactionis PCR accedunt, ac fluorescens intensio in processu reactionis signo reali tempore quantitatis PCR instrumenti per quantitatem monitorem inducitur, ac demum notitia experimentalis enucleatur et processit.

.amplificatio curva.curva describit processum dynamicum PCR.Curva PCR amplificatio non est vexillum actuum curvae exponentialis, sed curvae sigmoideae.

[Rostra periodus amplificationis curvae]Crescente numero cyclorum PCR, inactivatio polymerasis DNA, deperditio dNTPs et primariorum, ac synthesis reactionis inhibitio per reactionem pyrophosphate producti etc., PCR exponentialiter non semper dilatatur.ac tandem campum ingredior.

[Exponentialis Augmentum regionis amplificationis curvae]Etsi Phase campestris valde variat, in regione quadam incrementi exponentialis regionis amplificationis curvae, repetitio valde bona est, quae magni ponderis est pro analysi quantitatis PCR.

[Limen valorem and Ct value]Terminum valorem deprehensionis fluorescens in opportunitate positionis in exponentiali incrementi area amplificationis curvae constituimus, nempe valorem limen (Limen).Intersectio pretii liminis et curvae amplificationis est Ct valorem, id est Ct valorem, refert numerum cyclorum (Limen Cycle) cum limen attingitur.

Graph infra clare ostendit necessitudinem inter lineam limen et amplificationem curvam, limen et Ct valorem.

.Quomodo quanti?.

Probatum est mathematicis theoriis Ct valorem habere necessitudinem inversam linearem cum logarithmo numerorum initialium principiorum.Tempus reale PCR monitores PCR amplificationis res in tempore reali et quantificat eas in amplificatione exponentiali phase.

Pro quolibet cyclo PCR, DNA exponentialiter per 2 tempora crevit, et mox in planitiem pervenit.

Assumens quod moles incipiens A * DNA est₀ , post cyclos n, productum theoricum quantum DNA exprimi potest:

A _n =A ₀ 2ⁿ

Quo magis initialis DNA quantitas A 0 est, eo celerius producti ampliati moles deprehensio valorem An attingit, et numerus cyclorum cum An attingens est valorem Ct.Hoc est, quo magis initialis DNA quantum A 0 est, eo prior ampliatio curvae cacumina, et debitus numerus cyclorum n minor est.

Gradientem dilutionem vexillum notae intentionis notae exequimur et ea utimur ut exemplum Veri Temporis PCR, et series amplificationis curvarum aequis intervallis in ordine incipiendi DNA tantum ab plus in minus habebitur.Secundum relationem linearem inter valorem Ct et logarithmum numeri principiorum templates, a[vexillum curva] creari potest.

Substituendo Ct valorem specimen ignota intentione in curvam vexillum, obtineri potest initialis template moles exempli ignoti concentrationis, quod est principium quantitatis Veri temporis PCR.

Deprehensio modus Verus Time PCR

Tempus Verus PCR detegit PCR amplificationem productorum, detectionem fluorescentiae intensionis in systemate reactionis.

Principium Fluorescent Dye Embedding Methodus.

Fluorescent colores, ut TB Viridis ®, non speciose ligare potest DNA duplicato subductae in PCR systemata et fluororem in ligatura.

Fluorescens intensio in systematis reactionis auctis exponentialiter cum incremento PCR cyclorum.Detegendo intensionem fluorescentiae, moles DNA amplificationis in systemate reactionis in reali tempore viverra potest, et tunc moles principii templates in sample vicissim aestimari potest.

.Principium methodus specillum fluorescentium.

fluorescent specilloest ordo acidi nuclei cum globus fluorescentibus in 5° fine et exstinguientis coetus in 3° fine, qui specialiter ligare potest ad Formulam.Integrum specillum, fluorescere a fluorophore emissa exstinguitur globi nec fluorescere.specillo dissoluto, substantia fluorescens dissociat et fluorescentiam emittit.

Specillum fluorescens ad solutionem per reactionem additur.Per processum in furnum, specillum fluorescentium ad specificum Formulae situm ligabit.Per processum extensionem, 5′ →3′ activitas exonucleasis PCR enzyme in specillo fluorescenti hybridizato cum template dissoluere potest, et substantia fluorescens dissociatur ad fluorescentiam emittere.Detegendo vehementiam fluorescentiam specii in systemate reactionis, propositum ex magna amplificatione quantitatis PCR producti obtineri potest.

.Electio Fluorescens Detection Methodo.

Si sequentia distinguere adhibetur cum alta homologia et multiplex PCR deprehensio facienda est ut SNP analysin typing , specillum fluorescens pernecessarium est.
Ad alia tempora per experimenta realia, methodus simplex, facilis et humilis sumptus chimaerae fluorescentis adhiberi potest.

probesStrong specificity capax multiplex PER

Defectus

Alta proprietas ad ampliationem requisita;

multiplex PCR perfici nequit Necessarium est ad specificas speculationes designandos, magnos sumptus;

interdum explorare consilium difficile

Related Products: