• facebook
  • linkedin
  • youtube

Nuper aliquid mirabile repertum!Multi experimenta provectus professionales circa eum ne sciunt quidem quaedam puncta experimentalis cognitionis fundamentalis.

Exempli causa, respondere potes sequentibus quaestionibus?

Estne differentia inter OD260 et A260?Quid sibi vult?
OD est abbreviatio densitatis opticae (densitatis opticae), A est abbreviatio absorbance (absorbance), duae notiones sunt idem actu, "densitas optica" est "absorbantia", at "densitas optica" in linea cum signis maxime nationalibus et magis normatis.

Plerumque metimur valorem OD ad 260nm computare intentionem acidi nuclei, quid ergo 1OD significat?
Acidum nucleicum maximam absorptionem apicem habet ad necem 260nm, quod tam DNA quam RNA continet, quam fragmenta acidi nucleici redacta (hoc cardo cardinis est).
Valor OD ad necem 260 um mensuratus ut OD260 commemorabatur.Si specimen est purus, valorem OD260 concentratio acidi nuclei computare potest.
1 OD260=50 μg/ml dsDNA (duplex DNA subductis)
= 37 μg/ml ssDNA (subductis DNA)
=40 μg/ml RNA
=30 μg/ml dNTPs (oligonucleotides)
Estne nexus et differentia inter RT-PCR, Realtime-PCR et QPCR?
RT-PCR brevis est in Reverse Transcription PCR
Verus tempus PCR=qPCR, breve pro quantitativo Verus tempus PCR
Etsi tempus reale PCR (quantitatis PCR fluorescentis temporis reali) et Transscriptio inversa PCR (transscriptio inversa PCR) utraque abbreviata esse videtur ut RT-PCR.Sed conventio internationalis est: RT-PCR proprie refertur ad transcriptionem transversam PCR.

Quid vulgo nt, bp, kb sunt ut longitudinem DNA/RNA in biologia describant?
nt = nucleotide
bp = basi par basi par
kb = kilobase

Nimirum multa de his minutiis non curant diceres!Hoc quisque facit, et nemo quid sit, rogabit.Scis hoc supervacaneum esse, recte?

Non, non, non, hoc scire valde necessarium est.propter quod?
Quia vis post articulum!Frater!Utrum ad graduationem intendas an res gestas scientificas persequaris, innitendum articulis ad loquendum!

Extraction acidum nuclei simplicissimum et fundamentalissimum experimentum esse debet.Qualitas extractionis acidi nuclei directe determinat eventus experimentorum sequentium.

Etsi multoties dixi, multi tamen amici non curant.Hoc tempore articulum constitui!

image1
Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments, referred to as MIQE, est copia fluorescentiae quantitatis experimenti normae internationales deductae, quae minima signa proponit ad informationem experimentalem necessariam ad aestimandum fluorescentiam quantitatis pcr experimenta et articulos evulgandos.Per condiciones experimentales et methodos analysi ab experimento provisos, exploratores validitatem experimentalem investigatoris indagantes melius aestimare possunt.
image2
Perspici potest quod in sectione extractionis acidi nucleici propositae sunt hae detectiones;

"E" informationes indicat quae faciendae sunt et "D" indicat informationes quae praebendae si opus sit.

Forma valde perplexa est, immo dicere omnes necessitates ab eo proficisci volo

puritas (D), cede (D), integritas (E) et constantia (E) aestimandi acida nucleica in his quattuor aspectibus.

Secundum habitum experimentalem, primo loqui de modos aestimationis puritatis et defectus.

OD mensurae modus est in experimentis gratissimus et facillima deprehensio.Principium, hic singula non ingrediar.Multa laboratoria nunc spectrophotometris ultra-micros utuntur ad exemplaria acidi nuclei directe quantitative resolvendo.Dum valorem absorbance ostendit, propositum directe dat valorem retrahitur (acidi nuclei, interdum et tinctura fluorescentis) et rationes cognatae.Quod attinet ad analysin valoris OD, hanc imaginem serva et bene eris.

Universalis OD valorem solution album

image3Paucae tamen cautiones tibi separatim proferendae sunt.

(Nam scio vos esse eos qui salvant et exspectant donec eis opus sit).

Nota 1 Equipment

Valor OD diversis instrumentis afficietur.Quamdiu OD260 intra certum spatium est, valores OD230 et OD280 significantes sunt.Exempli gratia, absorbens range communis Eppendorf D30 ad 260nm est 0~3A, et NanoDrop One Thermo ad 260nm est.absorbance range of 0.5~62.5A.

Nota 2Liquidum tenui

Valor OD potest affici dilutione diversorum regentium.Exempli gratia, lectio RNA in pH . OD260/2807.5 10mM Trisquiddam est inter 1.9-2.1, cum inneutrum aqueumproportio inferior erit, fortasse tantum 1.8-2.0, sed hoc non significat qualitatem RNA mutare differentiam.

Nota 3RELICTUM substantiae

Exsistentia substantiarum residuarum accurate mensurae concentrationis acidi nucleici afficiet, ideo necesse est ut interdum, phenol, polysaccharide et polyphenol residua in exemplis acidorum nucleiculorum quam maxime vitanda sit.

Re quidem vera extractio cum regentibus organicis vetus est modus.In rhoncus commercialis, effectus extractio per adsorptionem silica-fundatam columnam cum centrifugatione coniunctam effici potest, vitando reagentia toxica et noxia organica quae difficilia sunt ad removendum etc.Ornamentum extractionis acidi nuclei praecogniti, DNase/RNase et toxico reagentes organici per operationem, celeriter et tutum non utitur., eteffectus estbonumCalvum esse dixit, sed scire te volo.

Exemplum 1: Genomic DNA extractio cedit et puritas

Solo praecognitio DNA Isolationis Ornamentum (DE-05511) specimina solo e variis fontibus tractat, et quantitatem ac puritatem genomic DNA consecuta monstrantur in sequenti tabula:
image4Exemplum 2: TEXTUS RNA cedit extractio et puritas

Animal Total RNA Isolation Ornamentum (RE-03012) varia exempla textus processit, et quantum et puritas RNA consecuta in tabula infra monstrantur (pro mus textus);
image5Sed cum OD pretii te fieri non putes.Habesne curam cardinis a fronte hausi tibi?

Notice

Moleculae acidi nucleici fragmenti etiam in absorbance computabuntur.Posito quod genomicum DNA residua in RNA haberes, OD valor tuus altissimus apparebit, sed rectus intentio RNA determinari non potest.Utrum degradatio tua sit RNA non liquet utrum degradatio sit, ideo adhuc opus est aestimationem comprehensivam methodum ad accuratiorem iudicium dandam, id est, integritatis acidi nuclei aestimationem, de qua in MIQE.


Post tempus: Jan-13-2022