Cell Direct RT qPCR Kit-SYBR GREEN I Direct Cell Lysis Cell Promptus One-gradus qRT-PCR Kits
Descriptiones
Hoc ornamentum singulare systematis quiddam utitur lysis qui RNA ab cultura exemplorum cellularum ad RT-qPCR reactiones cito dimittere potest, eoque tempore consumptionis et laboriosi RNA purificationis processum eliminat.RNA templates in iustis 7 minutis obtineri potest.The 5×Direct RT Mix et 2×Direct qPCR Mix-SYBR reagentia ab ornamento provisum cito et efficaciter consequitur quantitatem realem temporis PCR.
5×Direct RT Mix et 2×Direct qPCR Mix-SYBR validam inhibitorem tolerantiae habent, et lysatus exemplorum adhiberi potest ut exemplum RT-qPCR directe.Hoc ornamentum continet singularem RNA altam affinitatem transpositam Foregene transversam, et Hot D-Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl2quiddam, PCR optimizer ac stabilientem.
Specifications
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Ornamentum components
| Pars I | Quiddam CL |
| Plus II | |
| Quiddam ST | |
| Pars II | DNA Eraser |
| 5× Direct RT Mix | |
| 2× Direct qPCR Mix-SYBR | |
| 50× ROX Reference Dye | |
| RNase-Free ddH2O | |
| Instructiones | |
Features & commoda
■Simplex et efficax: cum Cell Direct RT technologia, RNA exempla in tantum 7 minutis obtineri possunt.
■ Specimen exiguum exiguum est, ut infima ac 10 cellulae probentur.
■ Alte throughput: cito deprehendere potest RNA in cellulis excultis 384. 96. 24, 12, 6-sculpturas bene.
■ DNA Eraser cito removere potest genomas emissas, ictum in experimentis subsequentibus proventuum valde minuere.
■ Optimised RT et qPCR ratio duos gradus RT-PCR transversos reddit, magis efficientem et PCR specialiorem, et resistens inhibitoribus reactioni RT-qPCR.
Ornamentum application
Scopus applicationis: cellulae excultae.
- RNA dimissa per exemplum lysis: solum applicabile ad RT-qPCR exemplum huius ornamenti.
- Ornamentum adhiberi potest ad sequentes fines: analysis gene expressionis, verificationis gene mediatae siRNA effectus silendi, medicamentum protegendi, etc.
Diagram
Repono et fasciae vitae
Pars I huius ornamenti condi debet in 4℃;Pars II condi debet -20℃.
Plus II Protease praetermittendum reponenda est in 4.
Reagens 2×Direct qPCR Mix-SYBR condi debet -20℃in tenebris;si saepius adhibeatur, etiam in 4° reponi potestad breve tempus repositione (usus intra 10 dies).
Real Time PCR primario design principia
Deinceps de primario et inversa primario
Nam Real Time PCR, primario consilio est ipsum.Primi se referunt ad proprietatem et efficientiam PCR amplificationis, et disponi possunt respectu sequentium principiorum:
Primae longitudinis: 18-30bp.
GC content: 40-60%.
Tm valor: designatio primario, ut primarius 5, valorem primi primi dare potest.Valores Tim primarii fluminis et amni quam proxime fieri debent.Tm formula calculi adhiberi potest etiam: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Cum PCR faciendo, temperatura sub primario Tm valoris 5°C plerumque eligitur ut in furnum temperatus (pars aucta in furnum temperatura augere potest specificitatem PCR reactionis).
Primitias et PCR products:
Design primarium PCR amplificationis productum longitudinis potius 100-150bp.
Primarios designare in area secundaria structurae Formulae vitanda est quam maxime.
Vitare formationem 2 vel plures bases complementariae inter 3′ fines fluminis et amni primariorum.
Primarius 3′ basis terminalis adesse non potest cum 3 continuis G vel C additis.
Ipsi primarii structuras complementarias habere non possunt, alioquin derepta structura formabitur, quae per amplificationem afficit.
in primo ordine quam aequaliter ATCG distribui debent, et vitanda est 3° basis terminalis, ut T.
Appendix 1：Cell Direct RT-qPCR Kit component supplementum pack
1.Cell Lysis SOLUTIO
|
| |||
| Ornamentum components (24-lysis ratio bene/bene) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| Parsego | Quiddam CL | 20 ml | 100 ml |
| Plus II | 400 μl | 1 ml 2 | |
| Quiddam ST | 1 ml 2 | 10 ml | |
| ParsII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml 2 |
2.RT Mix
|
| |
| Ornamentum components (20 μl ratio reactionis) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direct RT Mix | 800 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7 ml 2 |
|
| ||
| Ornamentum components (20 μl ratio reactionis) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | M T | |
| 2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml 2 | 1.7 ml 6 |
| 50× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
Instructio Manualis:
