Escherichia coli O157:H7 Nucleic Acidum Detection Kit (PCR Fluorescent Probe Method)
Ornamentum Description:
Cat.No.FP102
E. coli O157:H7 in cibo, pascendo, aquae speciminibus et exemplis circumiectis adhibitum est.
Descriptiones
E. coli O157:H7 in cibo, pascendo, aqua exemplaria et exempla environmental pro celeri detectione adhibita est.
[Principium probatio]Secundum principium technologiae fluorescentium PCR, primariorum specificae et speculatoria Taqman destinata sunt pro gene Escherichia coli O157: H7, et detecta per instrumentum fluorescentium PCR, ut deprehendatur deprehensio Escherichia coli O157: H7 detectio qualitativa DNA.
Ornamentum Contents
Nota: ROX canalis specillum non comprehenditur.
| Componentes | Specification | Quantity |
| quiddam A | Tubus | 1 |
| quiddam B | Tubus | 1 |
| Positivum imperium | Tubus | 1 |
| Negans imperium | Tubus | 1 |
Expectata Ritus
Ponitur pro rapid detection and screening of E. coli O157:H7 in food, feed, water samples and environmental samples.
Condiciones et Expiration Date
Thesaurizate -20℃ in tenebris et vitare crebra congelatio et tabidaque.
Validitatem tempus sit XII "menses, et dies productio in exterioribus fasciculis ostenditur.
Instrumenta et Consumables
Fluorescent quantitatis PCR instrumenti, fistulae sclopetis et apicibus congruentibus, vortex shaker, minium centrifugium.
Consuetudinem
1. Sample Processing
1.1 Sample type: Hoc ornamentum aptum est ad cibum, pascendum, aquam, exempla et alia exempla ab Escherichia coli O157:H7 contaminari suspicatus est.Ad cibum penitus processit productorum, potionum et aliarum substantiarum pigmenta continentium, lavari necesse est ad vitandam collectionem insignium fluorescentiae.
1.2 Sample processui: Refer ad "GB 4789.10-2016 Cibus Salutis Nationalis Standard Food Examen Microbiologicum Escherichia coli O157: H7 Test" ad sample praeparationem, locupletationem cultus et solitudo Escherichia coli O157: H7.
- Nucleic Acidum extractionem
Solutio locupletatis 20 mL sume in tubo centrifugii 1.5 mL, adde 200 µL lysatae microbialis (ornamentum adiectio desideratur), vortex pro 30 secundis, centrifugium breviter et sepone.
Animadvertit: Extractio acidi nucleici ex lysate intra X minutas compleri debet et diu condi non potest.
3. Acidum nuclei amplificatio
3.1 Convertere ad usum quantitatis fluorescentis pcr instrumentum.
Quiddam A et quiddam B ab ornamento, penitus liques et centrifuge breviter.Adde 18 μL Buffer A et 2 μL Buffer B unicuique fistulam per reactionem.Adde 5 mL singulas potestates negativas, acidum nucleicum extractum, et potestatem positivam in tubulis reactionis, pileum tubis et centrifugium breviter.
3.3 Tubus PCR reactionem ad fluorescentium PCR machinam transfer, et sequentibus rationibus utere ad experimenta amplificationis facienda: eligere XXV mL pro reactione system, colligere fluorescentiae signa LX°C pro singulis cyclis, et eligere FAM pro canali deprehensio.
| Gradus | Program | Numerus circuitus |
| 1 | 37℃ 5min | 1 |
| 2 | 9 5 3min | 1 |
| 3 | 95°C 15s | 4 0 |
| 60℃ 30s (collectio fluorescens) |
Duces problematum analysis
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Nulla RNA extrahi potest vel fructus acidi nucleici humile
Fere multae res sunt quae recuperationem efficientiam afficiunt, ut: specimen RNA content, ratio operandi, volumen elutionis, etc.
Analysis causarum communium
1.Ice balneum vel humilis temperatus (4° C) centrifugatio in operatione.
Suadentur: Locus temperatus (15-25° C) operandi, numquam balneum glaciei et centrifugium humilis temperatura.
2. Improprium specimen repono vel specimen repositionis nimis longum.
Propositum: Copia exempla in -80° C vel in nitrogenium liquida durata, et usum frigidum emortui repetitum devita;recenter collecta exempla pro RNA extractionem uti conantur.
3.Insufficient sample lysis
Commendatio: Quaeso ut specimen et solutionem laborativam (acrylamidis lineari) permixtam et incubatam pro 10 min ad cella temperie (15-25 ° C)
4. eluent addita male
Commendatio: Fac ut RNase-Free ddH2O addatur medium membranae columnae purificationis.
5.Improper volumen ethanolicum in Buffer viRW2
Propositum: Quaeso, praecepta sequere, volumen rectum ethanoli anhydri ad Buffer viRW2 adde et bene misce ante ornamentum utens.
6.Improper specimen usus.
Propositum: 200µl specimen per 500µl of Buffer viRL.Immodicus specimen volumen proveniet in rate extractionis RNA reducto.
7.Improper elution volume or incomplete elution.
Suadeatur: Elucida voluminis purificationis columna 30-50μl est;si effectus elutionis non satisfacit, commendatur addere prae-calefactum RNase-Free ddH.2O et extende tempus ponens in cella temperie, ut 5-10min
8.Purificatio columnae residuum habet ethanolum post lotam in Buffer viRW2.
Suggestio: Si ethanolum adhuc remanet post ablutionem in Buffer viRW2 et inanis-tubus centrifugationem pro 2min, purgatio columna relinqui potest ad cella temperies 5min post centrifugationem inanem-tubam ad ethanolum residuum plene removendum.
Degradatio RNA in moleculis purgati
Qualitas RNA purificatorum se habet ad factores ut repositionis specimen, RNase contaminationis, et operationis.
Analysis causarum communium
1. Exempla collecta non servata tempore.
Propositum: Si specimen in tempore post collectionem usus non est, illud in -80 vel liquidum NITROGENIUM statim repone.Moleculis RNA extractis, recentibus exemplis collectis, quoties fieri potest, uti conantur.
2. Exempla collecta saepe congelatio et tabida erant.
Propositum: Fuge iteratas congelatio et tabidaque (non plus quam semel) in collectione sample et repositione, alioquin cessus acidi nucleici decrescet.
3. RNase in camera operativa introducta vel non disponibiles chirothecae, larvae, etc. detritae sunt.
Suggestion: Extractio RNA moleculorum experimentorum optime conficitur in cubiculo separato RNA, et mensa experimentalis ante experimentum purgatur.Gerunt chirothecas et larvas disponibiles in experimento ad vitandam RNA degradationem quae per RNase introductio causatur.
4. Procuratio RNase in usu contaminata est.
Suggestion: Repone cum novis Viralibus RNA Isolation Ornamentum ad experimenta relata.
5. RNase contagione fistularum centrifugiorum, apicibus pipettarum etc. Suggestio: Fac ut tubulae, apicibus pipettae et tibiae centrifuge omnes sint RNase-Free.
RNA moleculis affectis experimentis amni
In RNA moleculae purgationis per columnam purificatae experimenta amni afficient si plus salis sint fauces vel servo, ut: transpositio transversa, septemtrionis Dele, etc.
1. Sunt reliquiae salis in moleculis eluted RNA.
Commendatio: Fac ut rectum volumen anhydroi ethanoli ad Buffer viRW2 adiectum sit, et lava columnam purificationis bis secundum rectam centrifugationem velocitatis in instructionibus operantis. Si adhuc sal iones remanent, addere potes Buffer viRW2 ad columnam purificationis, et relinque in cella temperie 5min.Tum facere centrifugationem ad removendum sal ions contagione maxime
2. There aretera ethanol in moleculis eluted RNA
Propositum: semel confirmans columnas purificationis ab Buffer viRW2 ablutas esse, tubus centrifugationem vacuam perficiat secundum velocitatem centrifugam in mandatis operantibus.Si adhuc ethanolum remanet, potest per 5 minuta in cella temperies relinqui post vacui-tubi centrifugationem ut residuum ethanolum quam maxime tollatur.
Instructio Manualis:
Viral RNA Isolation Kit Instruction Manual
